超薄切片RMC PowerTome PC的樣品制備流程
將一臺切片設備集成到日常樣品前處理流程中,其操作的順暢度和結果的穩定性直接影響著實驗進度。美國RMC PowerTome PC超薄切片機在常規實驗室使用中,提供了一套相對標準化的切片操作體驗,從樣品固定到獲得連續切片的整個過程有其自身的特點。
初次接觸這臺設備,直觀印象是其機械結構的扎實感。主體采用金屬材料,在操作時能感受到穩定性。樣品夾的夾持機構設計得比較直接,通過螺絲固定樣品,雖然調整時需要一些耐心以確保樣品方向正確,但一旦固定后通常比較牢靠。刀座部分可以安裝不同規格的玻璃刀或鉆石刀,以適應不同硬度的樣品,更換過程有明確的鎖定機制,操作起來不算復雜。
開始切片前的準備工作相對系統化。首先需要將包埋好的樣品塊修整出一個小而平的切面,這個過程通常在體視顯微鏡下進行,使用設備附帶或單獨的修塊機。將修整好的樣品塊裝入樣品夾,調整到合適的初始位置。安裝并調整好刀片,設置好切片厚度和速度參數,這些初始設置是后續獲得好切片的基礎。
對刀是切片開始前的重要步驟。在低倍放大下,緩慢推進樣品靠近刀口,直到在刀口附近看到樣品表面的反射光出現變化,表明樣品與刀口非常接近。這個過程需要細心,避免碰撞刀口。對刀完成后,便可以開始自動或手動的切片操作。設備運行時,樣品臂的往復運動平穩,切片的節奏可以通過速度旋鈕進行調節,以適應不同樣品的特性。
切片過程中,操作者需要觀察切片的形態。理想情況下,切下的切片應該是連續、等寬、平直的“帶子",漂浮在刀槽的水面上。如果切片出現褶皺、斷裂或厚度不均,通常需要調整樣品塊的角度、刀口的角度,或者檢查樣品包埋的硬度是否合適。PowerTome PC允許對這些參數進行微調,雖然調整的精細程度可能不如更昂貴的型號,但對于常規樣品通常足夠應對。
收集切片是另一個需要技巧的環節。用睫毛筆或細針將漂浮的切片帶引導到一起,然后用覆有支持膜的銅網或載玻片將其撈起。這個過程對手的穩定性有一定要求,但經過練習可以掌握。設備提供的照明系統有助于觀察刀槽水面上的切片,特別是透明或半透明的組織切片。
完成切片后的清理工作比較簡單。關閉電源,清理刀槽中的水,取下用過的刀片妥善處理。清潔樣品夾和刀座,去除可能殘留的包埋劑碎屑。保持設備清潔,特別是運動導軌部分的清潔,對長期穩定運行有幫助。
從整體體驗來看,使用PowerTome PC進行超薄切片是一項需要一定動手能力和經驗積累的技術工作。設備本身提供的是可控的機械運動平臺,切片質量的優劣很大程度上取決于操作者的技能以及對樣品特性、包埋工藝的理解。它不像全自動設備那樣可以“一鍵完成",但正是這種需要人工參與和判斷的過程,使得它成為許多實驗室技術人員掌握切片基本功的常見選擇。一旦掌握了基本流程和故障排除方法,它能夠穩定可靠地產出滿足常規電鏡或光鏡觀察所需的薄切片。
超薄切片RMC PowerTome PC的樣品制備流程